Enzymatic activity of bone markers on Lithobates catesbeianus (Shaw, 1802) growth during the ossification process / Atividade enzimática de marcadores ósseos no crescimento de Lithobates catesbeianus (Shaw, 1802) durante o processo de ossificação

Abstract In order to better understand the ossification processes in anurans our study was carried out on tadpoles and adults of Lithobates catesbeianus. In this sense, we characterized the kinetic properties of alkaline phosphatase with p-nitrophenylphosphatase (pNPP) and pyrophosphate (PPi) and evaluated the activities of tartrate-resistant acid phosphatase and acid phosphatase. The enzyme extracts were obtained from tadpoles and adult femurs, which were divided into epiphysis and diaphysis. After homogenization, the samples were submitted to differential centrifugation to obtain cell membranes and, further, to phospholipase C (PIPLC) treatment, to remove membrane-bound proteins anchored by phosphatidylinositol. The average of specific activity for pNPP hydrolysis (at pH 10.5) by alkaline phosphatase released by phosphatidylinositol-specific phospholipase C (PIPLC) from Bacillus cereus among different bone regions at different animal ages was 1,142.57 U.mg-1, while for PPi hydrolysis (at pH 8.0), it was 1,433.82 U.mg-1. Among the compounds tested for enzymatic activity, the one that influenced the most was EDTA, with approximately 67% of inhibition for pNPPase activity and 77% for PPase activity. In the case of kinetic parameters, the enzyme showed a "Michaelian" behavior for pNPP and PPi hydrolysis. The Km value was around 0.6mM for pNPPase activity and ranged from 0.01 to 0.11mM for PPase activity, indicating that the enzyme has a higher affinity for this substrate. The study of pNPP and PPi hydrolysis by the enzyme revealed that the optimum pH of actuation for pNPP was 10.5, while for PPi, which is considered the true substrate of alkaline phosphatase, was 8.0, close to the physiological value. The results show that regardless of the ossification type that occurs, the same enzyme or isoenzymes act on the different bone regions and different life stages of anurans. The similarity of the results of studies with other vertebrates shows that anurans can be considered excellent animal models for the study of biological calcification.

Resumo Para melhor compreender o processo de ossificação em anuros, nosso estudo foi conduzido em girinos e adultos de Lithobates catesbeianus. Nesse sentido, as propriedades cinéticas da fosfatase alcalina com p-nitrofenilfosfato (pNPP) e pirofosfato (PPi) foram caracterizadas, e as atividades enzimáticas das fosfatases ácida e ácida tartarato resistente foram avaliadas. Os extratos enzimáticos foram obtidos de fêmur de girinos e adultos, divididos em epífise e diáfise. Após a homogeneização as amostras foram submetidas à centrifugação diferencial para obter membrana celular e, em seguida, ao tratamento com fosfolipase C (PIPLC), para remover as proteínas de membrana ancoradas por fosfatidilinositol. A média da atividade específica da fosfatase alcalina, liberada pela PIPLC de Bacillus cereus, para a hidrólise de pNPP (pH 10,5) nas diferentes regiões do fêmur e idades dos animais foi de 1.142,57 U.mg-1, enquanto para a hidrólise do PPi (pH 8,0) foi de 1.433,82 U.mg-1. Entre os compostos testados para a atividade enzimática, o de maior influência foi o EDTA, inibindo aproximadamente 67% e 77% das atividades de pNPPase e PPase, respectivamente. Quanto aos parâmetros cinéticos, a enzima apresentou comportamento Michaeliano para a hidrólise dos dois substratos. O valor de Km foi de 0,6 mM para a atividade de pNPPase e variou de 0,01 a 0,11 para a atividade de PPase, indicando uma maior afinidade por esse substrato. O estudo da hidrólise de pNPP e PPi revelou que o pH ótimo aparente de atuação foi de 10,5 para o pNPP e 8,0 para o PPi, próximo ao fisiológico, sendo que esse é considerado o substrato natural da fosfatase alcalina. Os resultados demonstram que, apesar do tipo de ossificação que ocorre, a mesma enzima ou isoenzimas, atuam nos diferentes locais do osso e estágios de vida dos anuros. A similaridade dos estudos com os realizados com outros vertebrados apontam que os anuros podem ser considerados excelentes modelos animais para o estudo da calcificação biológica.

Enzymatic activity of bone markers on Lithobates catesbeianus (Shaw, 1802) growth during the ossification process

Abstract In order to better understand the ossification processes in anurans our study was carried out on tadpoles and adults of Lithobates catesbeianus. In this sense, we characterized the kinetic properties of alkaline phosphatase with p-nitrophenylphosphatase (pNPP) and pyrophosphate (PPi) and evaluated the activities of tartrate-resistant acid phosphatase and acid phosphatase. The enzyme extracts were obtained from tadpoles and adult femurs, which were divided into epiphysis and diaphysis. After homogenization, the samples were submitted to differential centrifugation to obtain cell membranes and, further, to phospholipase C (PIPLC) treatment, to remove membrane-bound proteins anchored by phosphatidylinositol. The average of specific activity for pNPP hydrolysis (at pH 10.5) by alkaline phosphatase released by phosphatidylinositol-specific phospholipase C (PIPLC) from Bacillus cereus among different bone regions at different animal ages was 1,142.57 U.mg-1, while for PPi hydrolysis (at pH 8.0), it was 1,433.82 U.mg-1. Among the compounds tested for enzymatic activity, the one that influenced the most was EDTA, with approximately 67% of inhibition for pNPPase activity and 77% for PPase activity. In the case of kinetic parameters, the enzyme showed a Michaelian behavior for pNPP and PPi hydrolysis. The Km value was around 0.6mM for pNPPase activity and ranged from 0.01 to 0.11mM for PPase activity, indicating that the enzyme has a higher affinity for this substrate. The study of pNPP and PPi hydrolysis by the enzyme revealed that the optimum pH of actuation for pNPP was 10.5, while for PPi, which is considered the true substrate of alkaline phosphatase, was 8.0, close to the physiological value. The results show that regardless of the ossification type that occurs, the same enzyme or isoenzymes act on the different bone regions and different life stages of anurans. The similarity of the results of studies with other vertebrates shows that anurans can be considered excellent animal models for the study of biological calcification.

Resumo Para melhor compreender o processo de ossificação em anuros, nosso estudo foi conduzido em girinos e adultos de Lithobates catesbeianus. Nesse sentido, as propriedades cinéticas da fosfatase alcalina com p-nitrofenilfosfato (pNPP) e pirofosfato (PPi) foram caracterizadas, e as atividades enzimáticas das fosfatases ácida e ácida tartarato resistente foram avaliadas. Os extratos enzimáticos foram obtidos de fêmur de girinos e adultos, divididos em epífise e diáfise. Após a homogeneização as amostras foram submetidas à centrifugação diferencial para obter membrana celular e, em seguida, ao tratamento com fosfolipase C (PIPLC), para remover as proteínas de membrana ancoradas por fosfatidilinositol. A média da atividade específica da fosfatase alcalina, liberada pela PIPLC de Bacillus cereus, para a hidrólise de pNPP (pH 10,5) nas diferentes regiões do fêmur e idades dos animais foi de 1.142,57 U.mg-1, enquanto para a hidrólise do PPi (pH 8,0) foi de 1.433,82 U.mg-1. Entre os compostos testados para a atividade enzimática, o de maior influência foi o EDTA, inibindo aproximadamente 67% e 77% das atividades de pNPPase e PPase, respectivamente. Quanto aos parâmetros cinéticos, a enzima apresentou comportamento Michaeliano para a hidrólise dos dois substratos. O valor de Km foi de 0,6 mM para a atividade de pNPPase e variou de 0,01 a 0,11 para a atividade de PPase, indicando uma maior afinidade por esse substrato. O estudo da hidrólise de pNPP e PPi revelou que o pH ótimo aparente de atuação foi de 10,5 para o pNPP e 8,0 para o PPi, próximo ao fisiológico, sendo que esse é considerado o substrato natural da fosfatase alcalina. Os resultados demonstram que, apesar do tipo de ossificação que ocorre, a mesma enzima ou isoenzimas, atuam nos diferentes locais do osso e estágios de vida dos anuros. A similaridade dos estudos com os realizados com outros vertebrados apontam que os anuros podem ser considerados excelentes modelos animais para o estudo da calcificação biológica.

The Influence of Morphological Characteristics on the Ball Throwing Velocity in the Professional Handball Players / Influencia de las Características Morfológicas en la Velocidad de Lanzamiento del Balón en los Jugadores Profesionales de Balonmano

SUMMARY: The aim of this study was to determine influence of upper limbs on the ball throwing velocity. A total of 10 professional handball players (25.74±4.84 years) participated in this study. All of them were playing in the top Montenegrin professional handball league. The results obtained in this study shows that upper limbs have high influence on ball throwing velocity. This study provides normative data and performance standards for professional handball. Coaches can use this information to determine the type of anthropometric characteristics that are needed for handball. Anthropometric parameters such as arm length, wrist diameter, hand length and arm span are the most relevant aspects related to ball throwing speed, given that these parameters cannot be changed through training, they should be taken into account when discovering talents.

El objetivo de este estudio fue determinar la influencia de los miembros superiores sobre la velocidad de lanzamiento de la pelota. En el estudio participaron un total de 10 jugadores profesionales de balonmano (25,74±4,84 años). Todos ellos jugaban en la principal liga profesional de balonmano de Montenegro. Los resultados obtenidos mostraron que los miembros superiores tienen una alta influencia en la velocidad de lanzamiento de la pelota. Este estudio proporciona datos normativos y estándares de rendimiento para el balonmano profesional. Los entrenadores pueden utilizar esta información para determinar el tipo de características antropométricas necesarias para el balonmano. Los parámetros antropométricos como la longitud del brazo, el diámetro de la muñeca, la longitud de la mano y la envergadura del brazo son los aspectos más relevantes relacionados con la velocidad de lanzamiento de la pelota, dado que estos parámetros no se pueden cambiar mediante el entrenamiento, deben tenerse en consideración a la hora de descubrir talentos.

Biodegradación de polietilenglicol 400 con consorcio de Pseudomonas sp. y Rhizobium trifolii

Se evaluó la biodegradación de polietilenglicol de peso molecular 400 - PEG 400 con el consorcio Pseudomonas sp. y Rhizobium trifolii en reactores en Batch; para determinar las condiciones óptimas de operación del reactor se preparó medio con sales mínimas esenciales suplementado con peptonaCSMEP; en estos medios se estimó el comportamiento del consorcio con condiciones de temperatura entre 15-37°C, pH en un rango de 5-9 y concentración de PEG 400 del .1-2%. Con los resultados obtenidos en estos ensayos previos se ensamblaron tres reactores en Batch - BK. Se analizaron 14 muestras del contenido de cada uno de los reactores durante 20 días para medir la biodegradación del PEG 400 usando demanda química de oxígeno - DQO en sistema de digestión cerrado. Se obtuvo una disminución de hasta el 98.5% del poliéter, lo que mostró que la simbiosis fue efectiva para alcanzar una remoción importante del contaminante.

The biodegradation of polyethylene glycol of molecular weight 400 - PEG 400 was evaluated with the consortium Pseudomonas sp. and Rhizobium trifolii in Batch reactors. To determine the optimal operating conditions of the reactor, a medium with minimum essential salts supplemented with CSMEP peptone was prepared; In these media, the behavior of the consortium was estimated with temperature conditions between 15-37°C, pH in a range of 5-9 and PEG 400 concentration of .1-2%. With the results obtained in these previous tests, three Batch - BK reactors were assembled. 14 samples of the contents of each one of the reactors were analyzed during 20 days to measure the biodegradation of PEG 400 using chemical oxygen demand - COD in a closed digestion system. A decrease of up to 98.5% of the polyether was obtained, which showed that the symbiosis was effective to achieve an important removal of the contaminant.

Analysis of drying kinetic of brewer ́s spent grains: effect of the temperature on the physical properties and the content of bioactive compounds / Análisis de la cinética de secado del bagazo residual de malta: efecto de la temperatura sobre las propiedades físicas y el contenido de compuestos bioactivos

Background: Brewer ́s spent grain (BSG) is a biomass by-product generated in large volumes during industrial beer production. BSG has become a growing environmental problem, as most breweries discard it inappropriately, negatively impacting the environment. Alternatives for the exploitation of this by-product have consisted of elaborating food supplements for farm animals, obtaining biofuels, developing adsorbents, and obtaining substances for the food industry. However, the high moisture content in BSG (approximately 70%), poses a significant challenge in exploring various reuse alternatives. Therefore, the implementation of a pre-drying process becomes essential. Objective: This study aimed to analyze the BSG drying kinetics at different temperatures and the effect of the drying temperature on the physical properties and the content of bioactive compounds. Methods: BSG samples were dried at different temperatures (50, 60, 70, 80, 90, and 105°C) and analyzed for their moisture ratio, water activity, total polyphenol content (TPC), and DPPH (1,1-diphenyl-2-picrylhydrazil) radical scavenging activity. Also, four kinetics models were fitted to the drying data. Results:It was determined that the effective diffusivity was between 5.23x10

Antecedentes: El Bagazo residual de malta (BSG por sus siglas en inglés) es un subproducto biomásico generado en grandes volúmenes durante la producción industrial de cerveza. El BSG se ha convertido en un creciente problema para el medio ambiente, debido a que la mayoría de las cervecerías descartan inapropiadamente este residuo generando un impacto negativo al ambiente. Las alternativas para el aprovechamiento de este subproducto han consistido especialmente en la elaboración de suplementos alimenticios para animales de granja, obtención de biocombustibles, desarrollo de adsorbentes y obtención de productos para la industria alimentaria. Sin embargo, el alto contenido de humedad (~70%) del BSG representa un reto para el desarrollo de diferentes alternativas de reutilización, por lo que se hace necesario un proceso de secado previo. Objetivos: En este estudio se analizó la cinética de secado del BSG a diferentes temperaturas y el efecto de la temperatura de secado sobre sus propiedades físicas y contenido de compuestos bioactivos. Métodos: Las muestras de BSG fueron secadas a diferentes temperaturas (50, 60, 70, 80, 90 y 105°C) y analizadas en términos de razón de humedad, actividad acuosa, contenido de polifenoles totales (TPC) y actividad secuestradora del radical DPPH. Además, se ajustaron 4 modelos cinéticos a los datos de secado. Resultados: Se determinó que la difusividad efectiva del BSG varió entre 5.23x10

Crohn's disease: review and standardization of nomenclature / Doença de Crohn: revisão e padronização da nomenclatura

Abstract Crohn's disease is an inflammatory bowel disease that can affect any segment of the gastrointestinal tract. It has a variable clinical course, with alternating periods of disease activity and remission. Because the incidence and prevalence of Crohn's disease have been increasing, evaluation by imaging methods has become more important. The most widely used methods are computed tomography enterography, magnetic resonance enterography (as an elective examination), and contrast-enhanced computed tomography (in the context of emergency). Computed tomography enterography and magnetic resonance enterography are useful for diagnosis, follow-up, evaluation of complications, and prognosis. Both can be used in order to evaluate the small bowel loops and the associated mesenteric findings, as well as to evaluate other abdominal organs. They both also can detect signs of disease activity, fibrosis, penetrating disease, and complications. The interpretation of such changes is essential to the multidisciplinary approach, as is the standardization of the nomenclature employed in the reports. In this paper, we review and illustrate the imaging findings of Crohn's disease, using the standardized nomenclature proposed in the multidisciplinary consensus statement issued by the Society of Abdominal Radiology, the Society of Pediatric Radiology, and the American Gastroenterology Association, with recommendations for descriptions, interpretations, and impressions related to those findings.

Resumo Doença de Crohn é uma doença inflamatória intestinal que pode acometer qualquer segmento do trato gastrointestinal, com curso clínico variado, alternando períodos de atividade de doença e remissão. Sua incidência e prevalência vêm aumentando, tornando a avaliação por métodos de imagem mais importante. Os métodos mais utilizados são enterotomografia computadorizada, enterorressonância magnética eletivamente e tomografia computadorizada com contraste no contexto da emergência. A enterotomografia computadorizada e a enterorressonância magnética são úteis para diagnóstico, seguimento, avaliação de complicações e para prognóstico. Avaliam as alças intestinais delgadas e os achados mesentéricos associados, além dos demais órgãos abdominais. Detectam sinais de atividade de doença, sinais de cronicidade e doença penetrante e complicações, importantes para a escolha do melhor tratamento. A interpretação dessas alterações é fundamental para que a equipe multidisciplinar trabalhe conjuntamente com compreensão da linguagem utilizada nos relatórios. Neste artigo, apresentamos uma revisão dos achados de imagem da doença de Crohn e ilustramos os possíveis achados dessa doença utilizando a nomenclatura padronizada proposta no consenso multidisciplinar composto pelas Sociedade de Radiologia Abdominal, Sociedade de Radiologia Pediátrica e a Associação Americana de Gastroenterologia, com recomendações de descrição, interpretação dos achados e recomendações de impressão.

New bicompartmental model: an application for the production of gases using the in vitro technique / Novo modelo bicompartimental: uma aplicação para a produção de gases pela técnica in vitro

The purpose of this study was to propose a bicompartmental nonlinear model and to identify the best-performing model between the proposed model and the bicompartmental logistic (BL) mode regarding the quality of fit to the curve of cumulative gas production (CGP) using corn silage, sunflower, and their mixtures. Gas production was measured 2, 3, 4, 6, 8, 9, 10, 12, 15, 19, 24, 30, 36, 48, 72, and 96 h after beginning the in vitro fermentation process. The generated data were used to generate the parameters of each model tested using the stats package of the R computational tool version 4.0.4. The mathematical models were subjected to the following selection criteria: the adjusted coefficient of determination (Raj.), residual mean square (RMS), mean absolute deviation (MAD), and Akaike information criterion (AIC). It was demonstrated that the proposed model had better performance with a high Raj., and lower values of RMS, AIC, and MAD than the bicompartmental logistic model for the prediction of the parameters of cumulative gas production (CGP), per to present a superior fit in the set of criteria according to the methodology and conditions in which the present study was developed.(AU)

No presente trabalho, com silagem de milho, girassol e suas misturas, objetivou-se propor um modelo não linear bicompartimental e identificar entre o modelo proposto e Logístico Bicompartimental (LB), aquele que apresenta maior qualidade de ajuste à curva de cinética de produção cumulativa de gases (PCG). A leitura da produção de gás foi realizada nos tempos 2, 3, 4, 6, 8, 9, 10, 12, 15, 19, 24, 30, 36, 48, 72 e 96 horas, após o início do processo de fermentação in vitro. Os dados gerados foram utilizados para geração dos parâmetros de cada modelo testado com auxílio do pacote stats da ferramenta computacional R versão 4.0.4. Os modelos matemáticos foram submetidos aos seguintes critérios de seleção o coeficiente de determinação ajustado (Raj.), quadrado médio do resíduo (QMR), desvio médio absoluto (DMA) e o critério de informação de Akaike (AIC). Foi demonstrado que o modelo proposto teve melhor desempenho com altos Raj., e menores valores de QMR, AIC e DMA, por apresentar um ajustamento superior no conjunto dos critérios em comparação com o modelo logístico bicompartimental para a predição dos parâmetros de produção cumulativa de gases (PCG) de acordo com a metodologia e condições em que foi desenvolvido o presente estudo.(AU)

Desenvolvimento de compostos de coordenação para aplicação foliar e elucidação do mecanismo de absorção / Development of coordination compounds for foliar application and elucidation of the absorption mechanism

O objetivo geral desse trabalho foi desenvolver compostos de coordenação com os metais cobre, manganês, zinco, cobalto, níquel e magnésio com os aminoácidos L- ácido aspártico e glutâmico para aplicação como fertilizantes foliares e elucidação de seus prováveis mecanismos de absorção pela planta. Como plano de trabalho, pretendeu-se produzir alguns complexos metálicos com agentes complexantes que confiram características específicas: alta estabilidade termodinâmica e cinética quando comparado a quelatos usados comercialmente dos mesmos metais; alta solubilidade; compatibilidade com herbicidas e fungicidas e alta estabilidade frente a variações de pH. Os compostos foram caracterizados no estado sólido e/ou em solução aquosa, através de técnicas disponíveis em nosso laboratório, na Central Analítica do IQ-USP e/ou nos laboratórios da ICL América do Sul Ind. e Com. SA. Com o desenvolvimento dos compostos de coordenação, foram avaliados alguns parâmetros considerados imprescindíveis para garantia da qualidade do produto gerado, que foram então comparados aos de quelatos de EDTA (ácido etilenodiaminotetraacético) comercializados atualmente e que demonstraram vantagens. Para avaliar a eficiência dos produtos gerados foi realizada aplicação foliar em ao menos uma cultura e verificado o teor de cada nutriente após período de absorção e resposta produtiva, evidenciando e determinando o mecanismo de absorção realizado pela planta. Como resultado, desenvolveu-se uma série de produtos com alta tecnologia agregada que trouxeram benefícios nutricionais, sustentando uma nutrição de qualidade além de serem ecologicamente favoráveis (eco-friendly portfolio)

This project aims the development of copper, manganese, zinc, cobalt, nickel and iron metal complexes with L-amino acids aspartic and glutamic acids for application as foliar fertilizers and elucidation of the probable incorporation/absorption mechanism by plants. As a work plan, it was intended to produce these metal complexes with complexing agents that provide specific characteristics: high thermodynamic and kinetic stabilities when compared to the corresponding EDTA chelates; high solubility; compatibility with herbicides and fungicides and high stability against pH variations. With the development of such coordination compounds, some parameters considered indispensable to quality assurance were then evaluated, in comparison to that of currently available commercial EDTA chelates. To evaluate the performance of the obtained compounds, two foliar applications in the same crop were carried out. Further, the content of each nutrient after the production period and the productive capacity were evaluated, aiming to elucidate the absorption mechanism of the plant. As a result, elaborated products with high added technology were obtained, capable of ameliorating the nutritional benefits, that can support an eco-friendly portfolio

Muscular strength training impacts in young athletes / Impactos do treinamento de força muscular em jovens atletas / Impactos del entrenamiento de la fuerza muscular en jóvenes atletas

ABSTRACT Introduction: Muscle strength is directly related to its cross-sectional area and the volume of its fibers, but there is no absolute linear relationship between hypertrophy and improvement in athletic performance. Under this complex perspective, muscle training strategies have been implemented to promote relevant muscle strength and improve overall athletic ability. Objective: Explore the impacts of muscle strength training on young athletes based on sport kinetic principles. Methods: we adopted the method of intragroup statistical comparison with body indexes of 10 volunteers undergoing muscle training focused on the core and lower limb set. Results: Muscle strength gain was effectively verified via electromyogram, and the test of athletic skills showed an evolution in jumping, balance, and reduction of wrong passes. Conclusion: Evidence-based muscle training can increase muscle strength and promote sports skill gain in young athletes. Level of evidence II; Therapeutic studies - investigation of treatment results.

RESUMO Introdução: A força muscular está ligada diretamente à área de sua seção transversal e ao volume de suas fibras, porém não há relação linear absoluta entre hipertrofia e melhora no desempenho atlético. Sob essa complexa perspectiva, estratégias de treinamento muscular vêm sendo implementadas para promover a força muscular relevante, no intuito de promover a melhora da capacidade atlética geral. Objetivo: Explorar os impactos do treinamento de força muscular nos jovens atletas baseado nos princípios cinéticos do esporte. Métodos: adotou-se o método de comparação estatística intragrupo com índices corporais de 10 voluntários submetidos ao treinamento muscular focado no conjunto do core e membros inferiores. Resultados: O ganho de força muscular foi efetivamente constatado via eletromiograma e o teste das habilidades atléticas demonstrou uma evolução no salto, equilíbrio e redução de passes errados. Conclusão: O treinamento muscular baseado em evidências consegue aumentar a força muscular e promover o ganho de habilidade esportiva nos jovens atletas. Nível de evidência II; Estudos terapêuticos - investigação dos resultados do tratamento.

RESUMEN Introducción: La fuerza muscular está directamente relacionada con su área transversal y con el volumen de sus fibras, pero no existe una relación lineal absoluta entre la hipertrofia y la mejora del rendimiento deportivo. Bajo esta compleja perspectiva, se han implementado estrategias de entrenamiento muscular para promover la fuerza muscular pertinente, con el fin de promover la mejora de la capacidad atlética general. Objetivo: Explorar los impactos del entrenamiento de la fuerza muscular en jóvenes atletas basándose en los principios de la cinética deportiva. Métodos: se adoptó el método de comparación estadística intragrupo con los índices corporales de 10 voluntarios sometidos a un entrenamiento muscular centrado en todo el núcleo y las extremidades inferiores. Resultados: La ganancia de fuerza muscular se verificó eficazmente a través del electromiograma y la prueba de habilidades atléticas mostró una evolución en los saltos, el equilibrio y la reducción de los pases erróneos. Conclusión: El entrenamiento muscular basado en la evidencia puede aumentar la fuerza muscular y promover la ganancia de habilidades deportivas en los atletas jóvenes. Nivel de evidencia II; Estudios terapéuticos - investigación de los resultados del tratamiento.

Análise cinética e cinemática da saída de bloco em natação de atletas deficientes visuais / Kinetic and kinemaic analysis of block start in swimming in visually impaired athletes

Objetivos: investigar e correlacionar a cinética e cinemática da saída de bloco em natação de atletas deficientes visuais e normovisuais. Métodos: foram comparados parâmetros de desempenho entre os nadadores de ambos os sexos. A amostra contou com 16 nadadores, sendo 4 cegos, 2 baixa visão e 10 normovisuais. Análise inferencial com teste Shapiro-Wilk, estatística inferencial teste T e, para correlação entre variáveis, o teste de Pearson, com nível de significância em 5%. Correlacionamos a variável dinamométrica, nas fases de tempo de bloco, tempo em 5 metros e tempo em 16 metros. Resultados: foram percebidas diferenças significativas de (0,030, 0,029 e 0,001), respetivamente, pois foram menores para os nadadores normovisuais. Na variável cinética, o pico de força resultante dos nadadores normovisuais foi, significativamente, maior (0,024). O ângulo de saída dos nadadores normovisuais foi também, significativamente, maior (0,030). Nas fases de tempo de reação, tempo de voo, força horizontal e vertical, ângulo de entrada e distância de voo, não apresentaram diferenças significativas. Observou-se uma correlação expressiva, entre as variáveis tempo de bloco e tempo em 5 metros (0,688); tempo de bloco e tempo em 16 metros (0,689); tempo em 5 metros e tempo em 16 metros (0,928); e o tempo de voo e ângulo de saída (0,941). O pico de força apresentou uma correlação significativa na maioria das variáveis do estudo com exceção do tempo de reação e o ângulo entrada. Conclusão: a ausência da visão acarreta na defasagem da performance e nos resultados em provas de natação de alto rendimento para deficientes visuais.

Objectives: to investigate and correlate the kinetics and kinematics of the starting block in swimming of visually impaired and visually impaired athletes. Methods: The method used was to compare performance parameters between swimmers of both sexes. The sample had 16 swimmers being 4 blind, 2 low vision and, 10 normovisuals. Inferential analysis with Shapiro-Wilk test, inferential statistics T-test, and for correlation between variables the Pearson's test, with a significance level of 5%. We correlated the dynamometric variable, in the phases of block time, time in 5 meters and time in 16 meters. Results: Resulting in significant differences of (0.030, 0.029, and 0.001, block time, 5 and 16 meters respectively) lower for the normovisual swimmers. In the kinetic variable, the peak force resulting from normal-vision swimmers was significantly higher (0.024). The departure angle of normal-vision swimmers was also significantly higher (0.030). In the phases of reaction time, flight time, horizontal and vertical force, entry angle and flight distance, there were no significant differences. An expressive correlation was observed between the variables block time and time in 5 meters (0.688); block time and time on 16 meters (0.689); time on 5 meters and time on 16 meters (0.928); and flight time and departure angle (0.941). The force peak showed a significant correlation in most of the variables under study except for the reaction time and the imput angle. Conclusion: the absence of vision leads to a lack of performance and results in high-performance swimming tests.

Cine phase-contrast magnetic resonance imaging evaluation of cerebrospinal fluid flow dynamics in healthy pediatric subjects / Avaliação da dinâmica do fluxo do líquido cerebrospinal por cine-ressonância magnética com contraste de fase em crianças saudáveis

Abstract Objective: To evaluate cerebrospinal fluid dynamics, using cine phase-contrast magnetic resonance imaging (cine-PC MRI), in healthy pediatric subjects, determining the normal flow values in this population, as well as identifying differences related to age, sex, and body surface area. Materials and Methods: This was a descriptive cross-sectional study involving 32 healthy children and adolescents, in whom the flow of cerebrospinal fluid through the cerebral aqueduct was evaluated quantitatively with cine-PC MRI. We used specialized software to analyze the images obtained with cine-PC MRI, drawing a region of interest on the aqueduct. A flow-time curve was obtained, as were automated measurements of the various parameters. Results: The following normal (mean) values were obtained: net flow, 1.10 ± 0.99 mL/m; stroke volume, 12.2 ± 10.1 μL/cycle; mean velocity, 0.72 ± 1.00 cm/s; peak systolic velocity, 5.28 ± 2.30 cm/s; peak diastolic velocity, 4.51 ± 1.77 cm/s. These values were not affected by age or sex. In addition, body surface area was not found to correlate significantly with mean velocity or stroke volume. Conclusion: In children and adolescents, the basic cerebrospinal fluid flow parameters, as determined by cine-PC MRI, appear to be independent of age and sex.

Resumo Objetivo: Avaliar a dinâmica do fluxo do líquido cerebrospinal por cine-ressonância magnética com contraste de fase em crianças saudáveis, para determinar os valores normais de fluxo nesta população, bem como a diferença entre medições distintas de acordo com idade, sexo ou área da superfície corporal. Materiais e Métodos: Convocamos 32 crianças saudáveis em uma análise descritiva de prevalência para a avaliação quantitativa do fluxo do líquido cerebrospinal pelo aqueduto de Sylvius. A análise foi realizada por meio de software especializado, desenhando uma região de interesse no aqueduto. Uma curva de fluxo-tempo e medições automáticas de diversos parâmetros foram obtidas. Resultados: Os seguintes valores normais foram obtidos: fluxo efetivo de 1,10 ± 0,99 mL/m; volume médio de 12,2 ± 10,1 μL/ciclo; velocidade média de 0,72 ± 1,00 cm/s; pico de velocidade sistólica de 5,28 ± 2,30 cm/s; pico de velocidade diastólica de 4,51 ± 1,77 cm/s. Esses valores não foram afetados pela idade ou sexo das crianças. Além disso, não foi encontrada correlação significativa entre a área corporal, a velocidade média e o volume sistólico. Conclusão: De modo geral, os parâmetros básicos do fluxo do líquido cerebrospinal independem de idade e sexo em crianças.

Respuesta humoral y persistencia de anticuerpos anti-SARS-CoV-2 en pacientes hospitalizados / SARS-CoV-2 antibodies kinetics in hospitalized patients

Resumen Luego de la infección por SARS-CoV-2 se producen anticuerpos específicos y continúa siendo objeto de estudio su cinética, cuantificación y umbral protector. Nuestro objetivo fue estudiar la cinética de aparición de anticuerpos IgG/IgM anti SARS-CoV-2, magnitud de respuesta y duración en el tiempo, en 55 pacientes hospitalizados por COVID-19, y relacionar el patrón de respuesta con diferentes parámetros demográ ficos y clínicos. Medidas con un ensayo cualitativo automatizado, VIDAS® SARS-Cov-2 (Biomerieux - ELFA) se evaluaron las variaciones en la concentración de anticuerpos a lo largo del tiempo con un modelo generalizado de efectos fijos. Todos los pacientes seroconvirtieron IgM e IgG, al día 10 y 10.5 respectivamente, patrón sincrónico mayoritario; no siendo de utilidad la IgM aislada como indicador de respuesta aguda. La sensibilidad clínica fue: semana 1, 30%, semanas 2 y 3, 72%, 4: 91% y 8: 96%. IgG permaneció detectable hasta los 6 meses (período de seguimiento) con gran heterogeneidad de magnitud; IgM negativizó en el 90.9% de los pacientes. Observamos un nivel mayor de IgM en los pacientes > 56 años, y en hombres respecto a mujeres. En pacientes con enfer medad pulmonar obstructiva crónica la respuesta de IgM está aumentada; los inmunocomprometidos y aquellos con enfermedad pulmonar intersticial difusa tuvieron menor IgM e IgG respectivamente. De nuestro grupo de pacientes, aquellos que requirieron cuidados críticos, asistencia respiratoria mecánica y los que fallecieron no presentaron diferencias significativas en magnitud de respuesta humoral respecto de quienes tuvieron un curso menos grave. La metodología utilizada refleja adecuadamente la cinética de anticuerpos.

Abstract Specific antibodies are produced after infection by SARS-CoV2. Currently, the understanding of antibody responses following infection with SARS-CoV-2 is limited including the magnitude, duration of responses and correlates of protective immunity following infection. Here we intended to characterize humoral immune response in a cohort of 55 hospitalized patients for COVID-19 and its relationship with different demographic and clinical parameters. The ELFA assay VIDAS® SARS-Cov-2 (Biomerieux) measured IgG/IgM antibodies. Their concentration over time was evaluated with a fixed effects generalized linear model. All patients seroconverted IgM and IgG, at day 10 and 10.5 respectively, showing a majority synchronous pattern; IgM alone would not be useful as a marker of acute response. Clini cal sensitivity was: week 1, 30%, weeks 2 and 3, 72%, 4: 91% and 8: 96%. IgG seropositivity was sustained in patients up to 180 days (last time point measured), in contrast, IgM response was short-lived (91days) in 90.9% of patients. Longer term follow-up is needed to determine the duration of IgG responses. We observed a higher level of IgM in patients > 56 years, and in men compared to women. In chronic obstructive pulmonary disease patients, the IgM response is increased, while in immunocompromised and interstitial lung disease patients, IgM and IgG were lower, respectively. Those patients who required critical care, mechanical ventilation and those who died did not present significant differences in the magnitude of humoral response compared to those who had a less severe course. The methodology used adequately reflects the kinetics of antibodies.

Desenvolvimento de bebidas lácteas probióticas adicionadas de polpa de morango e suplementadas com L-triptofano elaboradas a partir de leite bubalino e bovino / Development of probiotic dairy beverages with strawberry pulp and supplemented with L-tryptophan from buffalo and bovine milk

O objetivo deste estudo foi desenvolver uma formulação de bebida láctea bubalina probiótica adicionada de polpa de morango, comparando os efeitos do uso do leite de búfala e de vaca na elaboração dos produtos e verificando a possibilidade de suplementação com triptofano nos produtos lácteos probióticos. Como primeira etapa do trabalho, bebidas lácteas probióticas foram elaboradas a partir de leite bubalino e bovino, fermentadas com Streptococcus thermophilus TA040, Lactobacillus bulgaricus LB340 e Lactobacillus acidophilus La5, e formuladas com 0, 25 e 50% de soro em sua formulação. As bebidas foram avaliadas quanto à cinética de fermentação das culturas láticas utilizadas, ao teor de proteína, gordura e sólidos totais não gordurosos, pós-acidificação, viabilidade das culturas fermentadoras e sua capacidade de sobrevivência ao estresse gastrointestinal in vitro. As bebidas lácteas bubalinas apresentaram resultados superiores as bebidas bovinas. O uso do leite de búfala na elaboração das bebidas lácteas promoveu benefícios quanto as culturas láticas presentes nos produtos, exercendo efeito protetivo e influindo na preservação da viabilidade das bactérias ao longo do armazenamento refrigerado e durante a simulação do estresse gastrointestinal in vitro. As bebidas lácteas elaboradas com 25% apresentaram os resultados mais próximos aos obtidos pelos produtos controle, sem adição de soro, sendo selecionadas para a segunda parte do estudo. Nesta etapa, as formulações de bebida láctea com 25% de soro, foram acrescidas de um preparado com polpa de morango e bebidas sem adição da fruta, utilizadas como controle. As bebidas lácteas bubalinas frutadas, apresentaram menor teor de gordura e melhores características reológicas, com maior viscosidade e consistência do que os produtos controle, sem afetar a pós-acidificação, o perfil de ácido graxo, assim como, a viabilidade e a resistência às condições de estresse gastrointestinal in vitro das culturas fermentadoras. A avaliação da possibilidade de suplementar lácteos probióticos com triptofano foi realizada em conjunto com a Universidade de Milão. Para isso, iogurtes probióticos receberam adição de triptofano antes ou após a fermentação, sendo avaliados com relação ao perfil de pós-acidificação, quantidade de triptofano nos produtos, número de células viáveis por plaqueamento e citometria de fluxo ao longo do armazenamento a 25° e 4°C. Complementarmente, a influência da presença do triptofano no crescimento e produção de compostos antimicrobianos pelas culturas láticas, também foi avaliada. A adição de triptofano após a fermentação dos iogurtes, que foram armazenados sob refrigeração (4°C), além de não afetar a pós-acidificação dos produtos, apresentou benefícios quanto a viabilidade L. acidophilus, redução do dano e aumento do número de células vivas, promovendo teor maior do aminoácido nos iogurtes. A presença do triptofano nos meios de cultivo, também influenciou de forma positiva o crescimento de S. thermophilus e L. acidophilus, melhorando o desenvolvimento das bactérias durante a fermentação e influindo em uma maior atividade antilistérica por parte do S. thermophilus. Diante da influência positiva da aplicação do leite de búfala na elaboração das bebidas lácteas, assim como, a adição do triptofano em iogurtes probióticos, a suplementação do aminoácido em bebidas lácteas bubalinas frutadas permitiria a obtenção de um produto funcional, onde seus benefícios estariam relacionados tanto ao consumo do probiótico presente no produto quanto a complementação de triptofano na dieta do consumidor

The aim of this study was to develop a formulation of probiotic buffalo dairy beverage added with strawberry pulp, comparing the effects of using buffalo and cow's milk in the preparation of products and verifying the possibility of tryptophan supplementation in probiotic dairy products. As a first stage of the work, probiotic dairy beverages were made from buffalo and bovine milk, fermented with Streptococcus thermophiles TA040, Lactobacillus bulgaricus LB340 and Lactobacillus acidophilus La5, and formulated with 0, 25 and 50% whey in their formulation. The beverages were evaluated for the fermentation kinetics of the used lactic cultures, the levels of protein, fat and total no fat solids, post-acidification, fermenting cultures viability and their ability to survive gastrointestinal stress in vitro. Buffalo milk use in dairy beverages production promoted benefits regarding the lactic cultures present in the products, exerting a protective effect and influencing the viability preservation of bacteria during the cold storage and simulation of gastrointestinal stress in vitro. Dairy beverages made with 25% whey addition showed results similar to those obtained by the control products, without whey addition, being selected for the second part of the study. In this part, the dairy beverages formulations with 25% whey, were added with a preparation were added with a strawberry pulp preparation and dairy beverages without added fruit, used as a control. Fruity bubaline dairy beverages had lower fat content and better rheological characteristics, with higher viscosity and consistency than control products, without affecting post-acidification, fatty acid profile, as well as viability and resistance to in vitro gastrointestinal condition of fermented cultures. The possibility of supplementing probiotic dairy products with tryptophan was evaluated in partnership with the University of Milan. For this, probiotic yogurts received the addition of tryptophan before or after fermentation, being evaluated in relation to the post-acidification profile, tryptophan amount in the products, viable cell number per plating and flow cytometry during storage at 25°C and 4°C. In addition, the influence of the tryptophan presence on the growth and production of antimicrobial compounds by lactic cultures was also evaluated. The addition of tryptophan after the yogurt fermentation, which were stored under refrigeration (4°C), in addition to not affecting the post-acidification of the products, showed benefits to the viability of L. acidophilus, reduced the damage and increased the number of cells promoting higher amino acid content in yogurts. Tryptophan presence in the culture media also positively influenced the growth of S. thermophiles and L. acidophilus, improving the development of bacteria during fermentation and influencing better antilisteric activity in the part of S. thermophiles. In view of the buffalo milk positive influence observed after the application in dairy beverage preparation, as well as the addition of tryptophan in probiotic yoghurts, amino acid supplementation in fruity buffalo dairy beverages would allow to obtain a functional product, where its benefits would be related both to the consumption of the probiotic present in the product as to the supplementation of tryptophan in the consumer's diet

Studies on the recombinant production and anticancer activity of thermostable L- asparaginase I from Pyrococcus abyssi / Estudos sobre a produção recombinante e atividade anticancerígena da L-asparaginase I termoestável de Pyrococcus abyssi

L-Asparaginase catalysing the breakdown of L-Asparagine to L-Aspartate and ammonia is an enzyme of therapeutic importance in the treatment of cancer, especially the lymphomas and leukaemia. The present study describes the recombinant production, properties and anticancer potential of enzyme from a hyperthermophilic archaeon Pyrococcus abyssi. There are two genes coding for asparaginase in the genome of this organism. A 918 bp gene encoding 305 amino acids was PCR amplified and cloned in BL21 (DE3) strain of E. coli using pET28a (+) plasmid. The production of recombinant enzyme was induced under 0.5mM IPTG, purified by selective heat denaturation and ion exchange chromatography. Purified enzyme was analyzed for kinetics, in silico structure and anticancer properties. The recombinant enzyme has shown a molecular weight of 33 kDa, specific activity of 1175 U/mg, KM value 2.05mM, optimum temperature and pH 80°C and 8 respectively. No detectable enzyme activity found when L-Glutamine was used as the substrate. In silico studies have shown that the enzyme exists as a homodimer having Arg11, Ala87, Thr110, His112, Gln142, Leu172, and Lys232 being the putative active site residues. The free energy change calculated by molecular docking studies of enzyme and substrate was found as ∆G ­ 4.5 kJ/mole indicating the affinity of enzyme with the substrate. IC50 values of 5U/mL to 7.5U/mL were determined for FB, caco2 cells and HepG2 cells. A calculated amount of enzyme (5U/mL) exhibited 78% to 55% growth inhibition of caco2 and HepG2 cells. In conclusion, the recombinant enzyme produced and characterized in the present study offers a good candidate for the treatment of cancer. The procedures adopted in the present study can be prolonged for in vivo studies.

A L-asparaginase, que catalisa a degradação da L-asparagina em L-aspartato e amônia, é uma enzima de importância terapêutica no tratamento do câncer, especialmente dos linfomas e da leucemia. O presente estudo descreve a produção recombinante, propriedades e potencial anticancerígeno da enzima de Pyrococcus abyssi, um archaeon hipertermofílico. Existem dois genes que codificam para a asparaginase no genoma desse organismo. Um gene de 918 bp, que codifica 305 aminoácidos, foi amplificado por PCR e clonado na cepa BL21 (DE3) de E. coli usando o plasmídeo pET28a (+). A produção da enzima recombinante foi induzida sob 0,5mM de IPTG, purificada por desnaturação seletiva por calor e cromatografia de troca iônica. A enzima purificada foi analisada quanto à cinética, estrutura in silico e propriedades anticancerígenas. A enzima recombinante apresentou peso molecular de 33 kDa, atividade específica de 1.175 U / mg, valor de KM 2,05 mM, temperatura ótima de 80º C e pH 8. Nenhuma atividade enzimática detectável foi encontrada quando a L-glutamina foi usada como substrato. Estudos in silico mostraram que a enzima existe como um homodímero, com Arg11, Ala87, Thr110, His112, Gln142, Leu172 e Lys232 sendo os resíduos do local ativo putativo. A mudança de energia livre calculada por estudos de docking molecular da enzima e do substrato foi encontrada como ∆G ­ 4,5 kJ / mol, indicando a afinidade da enzima com o substrato. Valores de IC50 de 5U / mL a 7,5U / mL foram determinados para células FB, células caco2 e células HepG2. Uma quantidade de enzima (5U / mL) apresentou inibição de crescimento de 78% a 55% das células caco2 e HepG2, respectivamente. Em conclusão, a enzima recombinante produzida e caracterizada no presente estudo é uma boa possibilidade para o tratamento do câncer. Os procedimentos adotados na presente pesquisa podem ser aplicados para estudos in vivo.

Studies on the recombinant production and anticancer activity of thermostable L- asparaginase I from Pyrococcus abyssi / Estudos sobre a produção recombinante e atividade anticancerígena da L asparaginase I termoestável de Pyrococcus abyssi

L-Asparaginase catalysing the breakdown of L-Asparagine to L-Aspartate and ammonia is an enzyme of therapeutic importance in the treatment of cancer, especially the lymphomas and leukaemia. The present study describes the recombinant production, properties and anticancer potential of enzyme from a hyperthermophilic archaeon Pyrococcus abyssi. There are two genes coding for asparaginase in the genome of this organism. A 918 bp gene encoding 305 amino acids was PCR amplified and cloned in BL21 (DE3) strain of E. coli using pET28a (+) plasmid. The production of recombinant enzyme was induced under 0.5mM IPTG, purified by selective heat denaturation and ion exchange chromatography. Purified enzyme was analyzed for kinetics, in silico structure and anticancer properties. The recombinant enzyme has shown a molecular weight of 33 kDa, specific activity of 1175 U/mg, KM value 2.05mM, optimum temperature and pH 80°C and 8 respectively. No detectable enzyme activity found when L-Glutamine was used as the substrate. In silico studies have shown that the enzyme exists as a homodimer having Arg11, Ala87, Thr110, His112, Gln142, Leu172, and Lys232 being the putative active site residues. The free energy change calculated by molecular docking studies of enzyme and substrate was found as ∆G – 4.5 kJ/mole indicating the affinity of enzyme with the substrate. IC50 values of 5U/mL to 7.5U/mL were determined for FB, caco2 cells and HepG2 cells. A calculated amount of enzyme (5U/mL) exhibited 78% to 55% growth inhibition of caco2 and HepG2 cells. In conclusion, the recombinant enzyme produced and characterized in the present study offers a good candidate for the treatment of cancer. The procedures adopted in the present study can be prolonged for in vivo studies.

A L-asparaginase, que catalisa a degradação da L-asparagina em L-aspartato e amônia, é uma enzima de importância terapêutica no tratamento do câncer, especialmente dos linfomas e da leucemia. O presente estudo descreve a produção recombinante, propriedades e potencial anticancerígeno da enzima de Pyrococcus abyssi, um archaeon hipertermofílico. Existem dois genes que codificam para a asparaginase no genoma desse organismo. Um gene de 918 bp, que codifica 305 aminoácidos, foi amplificado por PCR e clonado na cepa BL21 (DE3) de E. coli usando o plasmídeo pET28a (+). A produção da enzima recombinante foi induzida sob 0,5mM de IPTG, purificada por desnaturação seletiva por calor e cromatografia de troca iônica. A enzima purificada foi analisada quanto à cinética, estrutura in silico e propriedades anticancerígenas. A enzima recombinante apresentou peso molecular de 33 kDa, atividade específica de 1.175 U / mg, valor de KM 2,05 mM, temperatura ótima de 80º C e pH 8. Nenhuma atividade enzimática detectável foi encontrada quando a L-glutamina foi usada como substrato. Estudos in silico mostraram que a enzima existe como um homodímero, com Arg11, Ala87, Thr110, His112, Gln142, Leu172 e Lys232 sendo os resíduos do local ativo putativo. A mudança de energia livre calculada por estudos de docking molecular da enzima e do substrato foi encontrada como ∆G – 4,5 kJ / mol, indicando a afinidade da enzima com o substrato. Valores de IC50 de 5U / mL a 7,5U / mL foram determinados para células FB, células caco2 e células HepG2. Uma quantidade de enzima (5U / mL) apresentou inibição de crescimento de 78% a 55% das células caco2 e HepG2, respectivamente. Em conclusão, a enzima recombinante produzida e caracterizada no presente estudo é uma boa possibilidade para o tratamento do câncer. Os procedimentos adotados na presente pesquisa podem ser aplicados para estudos in vivo.

Studies on the recombinant production and anticancer activity of thermostable L- asparaginase I from Pyrococcus abyssi

Abstract L-Asparaginase catalysing the breakdown of L-Asparagine to L-Aspartate and ammonia is an enzyme of therapeutic importance in the treatment of cancer, especially the lymphomas and leukaemia. The present study describes the recombinant production, properties and anticancer potential of enzyme from a hyperthermophilic archaeon Pyrococcus abyssi. There are two genes coding for asparaginase in the genome of this organism. A 918 bp gene encoding 305 amino acids was PCR amplified and cloned in BL21 (DE3) strain of E. coli using pET28a (+) plasmid. The production of recombinant enzyme was induced under 0.5mM IPTG, purified by selective heat denaturation and ion exchange chromatography. Purified enzyme was analyzed for kinetics, in silico structure and anticancer properties. The recombinant enzyme has shown a molecular weight of 33 kDa, specific activity of 1175 U/mg, KM value 2.05mM, optimum temperature and pH 80°C and 8 respectively. No detectable enzyme activity found when L-Glutamine was used as the substrate. In silico studies have shown that the enzyme exists as a homodimer having Arg11, Ala87, Thr110, His112, Gln142, Leu172, and Lys232 being the putative active site residues. The free energy change calculated by molecular docking studies of enzyme and substrate was found as G 4.5 kJ/mole indicating the affinity of enzyme with the substrate. IC50 values of 5U/mL to 7.5U/mL were determined for FB, caco2 cells and HepG2 cells. A calculated amount of enzyme (5U/mL) exhibited 78% to 55% growth inhibition of caco2 and HepG2 cells. In conclusion, the recombinant enzyme produced and characterized in the present study offers a good candidate for the treatment of cancer. The procedures adopted in the present study can be prolonged for in vivo studies.

Resumo A L-asparaginase, que catalisa a degradação da L-asparagina em L-aspartato e amônia, é uma enzima de importância terapêutica no tratamento do câncer, especialmente dos linfomas e da leucemia. O presente estudo descreve a produção recombinante, propriedades e potencial anticancerígeno da enzima de Pyrococcus abyssi, um archaeon hipertermofílico. Existem dois genes que codificam para a asparaginase no genoma desse organismo. Um gene de 918 bp, que codifica 305 aminoácidos, foi amplificado por PCR e clonado na cepa BL21 (DE3) de E. coli usando o plasmídeo pET28a (+). A produção da enzima recombinante foi induzida sob 0,5mM de IPTG, purificada por desnaturação seletiva por calor e cromatografia de troca iônica. A enzima purificada foi analisada quanto à cinética, estrutura in silico e propriedades anticancerígenas. A enzima recombinante apresentou peso molecular de 33 kDa, atividade específica de 1.175 U / mg, valor de KM 2,05 mM, temperatura ótima de 80º C e pH 8. Nenhuma atividade enzimática detectável foi encontrada quando a L-glutamina foi usada como substrato. Estudos in silico mostraram que a enzima existe como um homodímero, com Arg11, Ala87, Thr110, His112, Gln142, Leu172 e Lys232 sendo os resíduos do local ativo putativo. A mudança de energia livre calculada por estudos de docking molecular da enzima e do substrato foi encontrada como G 4,5 kJ / mol, indicando a afinidade da enzima com o substrato. Valores de IC50 de 5U / mL a 7,5U / mL foram determinados para células FB, células caco2 e células HepG2. Uma quantidade de enzima (5U / mL) apresentou inibição de crescimento de 78% a 55% das células caco2 e HepG2, respectivamente. Em conclusão, a enzima recombinante produzida e caracterizada no presente estudo é uma boa possibilidade para o tratamento do câncer. Os procedimentos adotados na presente pesquisa podem ser aplicados para estudos in vivo.

Desenvolvimento de bebidas lácteas probióticas adicionadas de polpa de morango e suplementadas com L-triptofano elaboradas a partir de leite bubalino e bovino / Development of probiotic dairy beverages with strawberry pulp and supplemented with L-tryptophan from buffalo and bovine milk

O objetivo deste estudo foi desenvolver uma formulação de bebida láctea bubalina probiótica adicionada de polpa de morango, comparando os efeitos do uso do leite de búfala e de vaca na elaboração dos produtos e verificando a possibilidade de suplementação com triptofano nos produtos lácteos probióticos. Como primeira etapa do trabalho, bebidas lácteas probióticas foram elaboradas a partir de leite bubalino e bovino, fermentadas com Streptococcus thermophilus TA040, Lactobacillus bulgaricus LB340 e Lactobacillus acidophilus La5, e formuladas com 0, 25 e 50% de soro em sua formulação. As bebidas foram avaliadas quanto à cinética de fermentação das culturas láticas utilizadas, ao teor de proteína, gordura e sólidos totais não gordurosos, pós-acidificação, viabilidade das culturas fermentadoras e sua capacidade de sobrevivência ao estresse gastrointestinal in vitro. As bebidas lácteas bubalinas apresentaram resultados superiores as bebidas bovinas. O uso do leite de búfala na elaboração das bebidas lácteas promoveu benefícios quanto as culturas láticas presentes nos produtos, exercendo efeito protetivo e influindo na preservação da viabilidade das bactérias ao longo do armazenamento refrigerado e durante a simulação do estresse gastrointestinal in vitro. As bebidas lácteas elaboradas com 25% apresentaram os resultados mais próximos aos obtidos pelos produtos controle, sem adição de soro, sendo selecionadas para a segunda parte do estudo. Nesta etapa, as formulações de bebida láctea com 25% de soro, foram acrescidas de um preparado com polpa de morango e bebidas sem adição da fruta, utilizadas como controle. As bebidas lácteas bubalinas frutadas, apresentaram menor teor de gordura e melhores características reológicas, com maior viscosidade e consistência do que os produtos controle, sem afetar a pós-acidificação, o perfil de ácido graxo, assim como, a viabilidade e a resistência às condições de estresse gastrointestinal in vitro das culturas fermentadoras. A avaliação da possibilidade de suplementar lácteos probióticos com triptofano foi realizada em conjunto com a Universidade de Milão. Para isso, iogurtes probióticos receberam adição de triptofano antes ou após a fermentação, sendo avaliados com relação ao perfil de pós-acidificação, quantidade de triptofano nos produtos, número de células viáveis por plaqueamento e citometria de fluxo ao longo do armazenamento a 25° e 4°C. Complementarmente, a influência da presença do triptofano no crescimento e produção de compostos antimicrobianos pelas culturas láticas, também foi avaliada. A adição de triptofano após a fermentação dos iogurtes, que foram armazenados sob refrigeração (4°C), além de não afetar a pós-acidificação dos produtos, apresentou benefícios quanto a viabilidade L. acidophilus, redução do dano e aumento do número de células vivas, promovendo teor maior do aminoácido nos iogurtes. A presença do triptofano nos meios de cultivo, também influenciou de forma positiva o crescimento de S. thermophilus e L. acidophilus, melhorando o desenvolvimento das bactérias durante a fermentação e influindo em uma maior atividade antilistérica por parte do S. thermophilus. Diante da influência positiva da aplicação do leite de búfala na elaboração das bebidas lácteas, assim como, a adição do triptofano em iogurtes probióticos, a suplementação do aminoácido em bebidas lácteas bubalinas frutadas permitiria a obtenção de um produto funcional, onde seus benefícios estariam relacionados tanto ao consumo do probiótico presente no produto quanto a complementação de triptofano na dieta do consumidor

The aim of this study was to develop a formulation of probiotic buffalo dairy beverage added with strawberry pulp, comparing the effects of using buffalo and cow's milk in the preparation of products and verifying the possibility of tryptophan supplementation in probiotic dairy products. As a first stage of the work, probiotic dairy beverages were made from buffalo and bovine milk, fermented with Streptococcus thermophiles TA040, Lactobacillus bulgaricus LB340 and Lactobacillus acidophilus La5, and formulated with 0, 25 and 50% whey in their formulation. The beverages were evaluated for the fermentation kinetics of the used lactic cultures, the levels of protein, fat and total no fat solids, post-acidification, fermenting cultures viability and their ability to survive gastrointestinal stress in vitro. Buffalo milk use in dairy beverages production promoted benefits regarding the lactic cultures present in the products, exerting a protective effect and influencing the viability preservation of bacteria during the cold storage and simulation of gastrointestinal stress in vitro. Dairy beverages made with 25% whey addition showed results similar to those obtained by the control products, without whey addition, being selected for the second part of the study. In this part, the dairy beverages formulations with 25% whey, were added with a preparation were added with a strawberry pulp preparation and dairy beverages without added fruit, used as a control. Fruity bubaline dairy beverages had lower fat content and better rheological characteristics, with higher viscosity and consistency than control products, without affecting post-acidification, fatty acid profile, as well as viability and resistance to in vitro gastrointestinal condition of fermented cultures. The possibility of supplementing probiotic dairy products with tryptophan was evaluated in partnership with the University of Milan. For this, probiotic yogurts received the addition of tryptophan before or after fermentation, being evaluated in relation to the post-acidification profile, tryptophan amount in the products, viable cell number per plating and flow cytometry during storage at 25°C and 4°C. In addition, the influence of the tryptophan presence on the growth and production of antimicrobial compounds by lactic cultures was also evaluated. The addition of tryptophan after the yogurt fermentation, which were stored under refrigeration (4°C), in addition to not affecting the post-acidification of the products, showed benefits to the viability of L. acidophilus, reduced the damage and increased the number of cells promoting higher amino acid content in yogurts. Tryptophan presence in the culture media also positively influenced the growth of S. thermophiles and L. acidophilus, improving the development of bacteria during fermentation and influencing better antilisteric activity in the part of S. thermophiles. In view of the buffalo milk positive influence observed after the application in dairy beverage preparation, as well as the addition of tryptophan in probiotic yoghurts, amino acid supplementation in fruity buffalo dairy beverages would allow to obtain a functional product, where its benefits would be related both to the consumption of the probiotic present in the product as to the supplementation of tryptophan in the consumer's diet

Momento aductor de la cadera durante la marcha en adultos mayores asintomáticos / Hip adductor moment during gait in asymptomatic older adults

Resumen Introducción: El momento articular durante la marcha se ha relacionado con diferentes procesos clínicos en la población adulto mayor, en Colombia no se cuentan con reportes propios. Objetivo: Analizar el momento aductor de la cadera durante la marcha de adultos mayores asintomáticos. Materiales y métodos: Se evaluó a 110 participantes siguiendo las referencias del software VICON NEXUS 2.8.1 modelo Full Body, se utilizó 2 plataformas de fuerza y el volumen de captura estuvo delimitado por 8 cámaras opto eléctricas Bonita 10. Se incluyó variables antropométricas, sociodemográficas, espaciotemporales y cinéticas durante la fase de apoyo, resaltando los dos picos máximos del momento aductor. Resultados: Las cifras del Pico Momento Aductor 1 y 2 (PMA1 y PMA2) fueron de 0,76 y 0,70 Nm/Kg respectivamente, estos picos se relacionaron con masa, talla e índice de masa corporal. Se construyó así una referencia para el análisis de adultos mayores asintomáticos. Conclusiones: La gráfica del momento aductor de la cadera es similar a la descrita por otros investigadores, pero en menor magnitud que en la población sintomática de coxartrosis.

Abstract Introduction: Although joint moment during waking has been associated with different clinical processes in the elderly population, there is a lack of reports in Colombia. Objective: To analyze the hip adductor moment during gait in asymptomatic older adults. Materials and methods: 110 participants were assessed using the VICON NEXUS 2.8.1. Full Body model software. 2 force platforms were used and the capture volume was delimited through 8 Bonita-10 optoelectronic cameras. Anthropometric, sociodemographic, spatiotemporal, and kinetic variables were included during the support phase, highlighting the two maximum peaks of the adductor moment. Results: The figures for Adductor Moment Peaks 1 and 2 (AMP1 and AMP2) were 0.76 and 0.70 Nm/Kg, respectively, which were related to mass, height and body mass index. Thus, a reference for the analysis of asymptomatic older adults was developed. Conclusion: The hip adductor moment graph is similar to that described by other researchers, but to a lesser extent than the values seen in coxarthrosis symptomatic population.

Evaluation of eggshell membrane as an alternative biopolymeric matrix for delivery of nimesulide / Avaliação da membrana da casca do ovo como uma matriz biopolimérica alternativa para entrega de nimesulida / Evaluación de la membrana de la cáscara de huevo como una matriz de biopolímero alternativa para la administración de nimesulida

SUMMARY Introduction: Eggshell membrane (ESM) is a tissue found between the eggshell and the albumen of eggs that has attractive properties for use in drug delivery systems. Aim: To incorporate in ESM and used it as a model drug in release studies. The color change and FTIR analysis of the biopolymer proved the incorporation of nimesulide in ESM. Results: The drug uptake was 176.83 and 122.69 mg g-1 by natural and cross-linked ESM. Release studies were carried out using a spectrophotometric flow system in simulated intestinal fluid pH 7.4. The release profiles showed that after 60 minutes 54.55 and 42.58 % of the drug were released from natural and cross-linked ESM, respectively. Kinetics parameters indicated that drug release was better described by the Higuchi model and through a non-Fickian release. Conclusion: Considering these results is proved that ESM has the potential to become a polymeric matrix for drug release systems.

RESUMO Introdução: a membrana da casca do ovo (MCO) é um tecido encontrado entre a casca e o albúmen de ovos que possui propriedades atrativas para uso em sistemas de liberação de fármacos. Objetivo: incorporar à MCO e utilizá-la como fármaco modelo em estudos de liberação. Mudança de coloração e análises de FTIR do biopolímero comprovaram a incorporação da nimesulida na MCO. A incorporação do fármaco foi de 176,83 e 122,69 mg g-1 na MCO natural e reticulada, respectivamente. Resultados: os estudos de liberação foram realizados usando um sistema de fluxo espectrofotométrico em fluido intestinal simulado pH 7,4. Os perfis de liberação mostraram que após 60 minutos 54,55 e 42,58 % do medicamento foram liberados da MCO natural e reticulada, respectivamente. Os parâmetros cinéticos indicaram que a liberação do fármaco foi mais bem descrita pelo modelo de Higuchi e por meio de uma liberação não Fickiana. Conclusão: considerando estes resultados, fica comprovado que a MCO tem potencial para se tornar uma matriz polimérica para sistemas de liberação de fármacos.

RESUMEN Introducción: La membrana de cáscara de huevo (MCH) es un tejido que se encuentra entre la cáscara de huevo y la albúmina de los huevos que tiene propiedades atractivas para su uso en sistemas de administración de fármacos. Objetivo: Incorporar en MCH y utilizarla como fármaco modelo en estudios de liberación. El cambio de color y el análisis FTIR del biopolímero demostraron la incorporación de nimesulida en MCH. Resultados: La captación del fármaco fue de 176,83 y 122,69 mg g-1 por MCH natural y reticulado. Los estudios de liberación se llevaron a cabo utilizando un sistema de flujo espectrofotométrico en líquido intestinal simulado pH 7,4. Los perfiles de liberación mostraron que después de 60 minutos el 54,55 y el 42,58 % del fármaco se liberó de la MCH natural y reticulada, respectivamente. Los parámetros cinéticos indicaron que la liberación del fármaco se describió mejor mediante el modelo de Higuchi y mediante una liberación no Fickian. Conclusión: De acuerdo con estos resultados, el MCH tiene el potencial de convertirse en una matriz polimérica para sistemas de liberación de fármacos.

Grandes mujeres científicas: Maud Leonora Menten / Great scientific women: Maud Leonora Menten

Maud Leonora Menten nació en Canadá, tuvo cuatro títulos universitarios: Bachiller en Artes, Master en Fisiología, médica y Doctora en Bioquímica. Trabajó en Estados Unidos, Alemania y Canadá. Trabajó en diferentes áreas: en la distribución de los iones cloruro en el sistema nervioso central, en tumores experimentales y su tratamiento con bromuro de radio, en el equilibrio ácido-base durante la anestesia, en el mecanismo hiperglucemiante de toxinas bacterianas, en el descubrimiento de un mecanismo de acoplamiento en química orgánica y hasta en la electroforesis de las hemoglobinas humanas. Sin embargo, el aporte por el cual es más conocida es su trabajo en el estudio de la cinética enzimática junto a Leonor Michaelis en 1913. El propósito de este trabajo es exponer la vida personal y académica de una científica conocida por la gran mayoría de los profesionales de la salud. La mujer que a principios del siglo XX trabajó con grandes investigadores de Canadá, Estados Unidos y Alemania, cuyos aportes científicos fueron reconocidos muchas décadas después. (AU)

Maud Leonora Menten was born in Canada; she had four university degrees, Bachelor of Arts, Master of Physiology, Physician and Doctor of Biochemistry. She worked in the United States, Germany, and Canada. Maud worked in different areas: the distribution of chloride ions in the central nervous system, experimental tumors and their treatment with radium bromide, the acid-base balance during anesthesia, the hyperglycemic mechanism of bacterial toxins, the discovery of a coupling mechanism in organic chemistry and even the electrophoresis of human hemoglobins. However, the contribution for which she is best known is for her work in the study of enzymatic kinetics with Leonor Michaelis in 1913. The aim of this paper is to expose the personal and academic life of a scientist known to the vast majority of Health professionals. The woman who, at the beginning of the 20th century, worked with great researchers from Canada, the United States and Germany, whose scientific contributions were recognized many decades later. (AU)